5.2
Stanovení bílkovin v sýru metodou podle Kjeldahla
Postup je modifikován podle Winklera.
Vzorek je mineralizován koncentrovanou kyselinou sírovou a ze síranu amonného je vytěsněn amoniak roztokem hydroxidu sodného destilací vodní parou do předlohy. Titrací předlohy odměrným roztokem kyseliny chlorovodíkové se zjistí jeho množství a přepočítá na obsah celkového dusíku. K přepočtu obsahu dusíku na hrubou bílkovinu se použije korekční součinitel, který vychází z průměrného obsahu dusíku v příslušné bílkovině.
Poznámka
Chemikálie:
  • Koncentrovaný roztok H2SO4
  • Směsný selenový katalyzátor
  • Roztok H3BO3, w = 4 %
  • Roztok Tashirova indikátoru (100 ml 0,03 % ethanolového roztoku methylčerveně a 15 ml 0,1 % roztoku methylenové modře)
  • Odměrný roztok HCl o c = 0,2 mol·l-1
Příklad
Postup:
  • Do mineralizační baňky vložit navážku vzorku asi 1 g s přesností 0,1 mg na filtračním papíru,
  • přidat asi 5 g směsného selenového katalyzátoru, 20 ml koncentrovaného roztoku H2SO4 a varné střípky,
  • mineralizovat při teplotě asi 420 °C po dobu 80 minut,
  • po vychladnutí mineralizát opatrně zředit 50 ml destilované vody a připojit k Parnas-Wagnerovu destilačnímu přístroji,
  • k destilačnímu přístroji připojit předlohu s 30 ml roztoku H3BO3, w = 4 %,
  • ke zředěnému mineralizátu přidat 50 ml roztoku NaOH, w = 33 %,
  • spustit destilaci po dobu 5 minut,
  • po ukončené destilaci do předlohy přidat 10 kapek Tashirova indikátoru a titrovat odměrným roztokem HCl o c = 0,2 mol·l-1 do šedého zbarvení.
Zobrazit řešení
Řešení
Výpočet:
pN=VHCl⋅fHCl⋅0,2803mn % mm
pb=pN⋅fN→b % mm
  • pN je obsah celkového dusíku (hmot. %)
  • VHCl je spotřeba odměrného roztoku HCl o c = 0,2 mol·l-1 (ml)
  • fHCl je korekční faktor odměrného roztoku HCl
  • 0,2803 je přepočtový koeficient, který udává počet gramů dusíku odpovídající 1 ml odměrného roztoku HCl o c = 0,2 mol·l-1
  • mn je navážka vzorku (g)
  • pb je obsah hrubých bílkovin (hmot. %)
  • fN→b je přepočtový koeficient dusíku na bílkovinu; pro mléčnou bílkovinu fN→B = 6,38
+
15. Reakční schéma Kjeldahlovy metody
Obr. 15. Reakční schéma Kjeldahlovy metody
+
16. Mineralizační zařízení
Obr. 16. Mineralizační zařízení
+
a … zdroj tepla, b … vyvíječ páry, c … odkalovací prostor, d … nálevka k plnění destilační baňky, e … odlučovač kapek, f … přestupník, g … destilační baňka, h … chladič, ch … předloha
Obr. 17. Schéma Parnas-Wagnerovy destilační aparatury
a … zdroj tepla, b … vyvíječ páry, c … odkalovací prostor, d … nálevka k plnění destilační baňky, e … odlučovač kapek, f … přestupník, g … destilační baňka, h … chladič, ch … předloha